Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami ad 6

Panel E pokazuje czarne zabarwienie przez nuklearne oznakowanie końcowe in situ w osteoklastach od pacjenta, który otrzymał 10 mg alendronianu dziennie przez 3 lata. Obecne są również morfologiczne zmiany apoptozy, w tym kondensacja jądrowa, fragmentacja i pofalowanie obwodowe. Panel F pokazuje osteoklast kontrolny bez barwienia od znakowania końca in situ od pacjenta z osteodystrofią nerek. Całkowita liczba osteoklastów na milimetr obwodu gąbczastego u pacjentów otrzymujących alendronian w dawce mg lub 5 mg na dobę nie różniła się istotnie od tej u pacjentów otrzymujących placebo. Jednak całkowita liczba osteoklastów była wyższa o czynnik 2,6 w grupie otrzymującej 10 mg alendronianu na dzień przez 3 lata niż w grupie placebo (P <0,01) (Figura 2A). Continue reading „Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami ad 6”

Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami ad 5

Jednak w grupie otrzymującej alendronian w dawce 20 mg na dobę przez 2 lata, a następnie placebo przez rok, szybkość tworzenia kości nie różniła się istotnie od tej w grupie otrzymującej placebo, wynik wskazujący, że efekt anty-modelowania leku został odwrócony rok po zaprzestaniu leczenia. Takie odwrócenie zostało zasugerowane przez wyniki pierwotnego 3-letniego badania alendronianu, 3, które wykazało większą długość mineralizującej powierzchni w grupie otrzymującej alendronian w dawce 20 mg na dzień przez 2 lata, a następnie placebo na rok, niż w innych grupach alendronowych. Zmniejszenie tworzenia się kości było w całości spowodowane zmniejszeniem obwodu znaczonego tetracykliną, a nie zmniejszeniem odległości między podwójnymi znacznikami tetracyklinowymi – wyrażeniem mineralnej stopy przyjmowania (Tabela 1). Funkcje histomorfometryczne błoniastych osteoklastów
Rycina 2. Ryciny 2. Continue reading „Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami ad 5”

Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami czesc 4

Osteoklasty pacjentów w grupie placebo miały mniej niż trzy z tych cech, ale nierzadko wykazywały niewielki stopień oderwania lub pyknozy jądrowej. Osteoklasty zostały następnie sklasyfikowane zgodnie z liczbą profili jądrowych, które można policzyć w sekcjach o grubości 5 .m; te sekcje zawierały tylko niewielką część olbrzymich osteoklastów, które miały grubość 80 .m do ponad 100 .m. Normalny osteoklast pokazano na rycinie 1. Pomiar apoptozy w sekcjach kości niezwiązanych
Apoptozę osteoklastów wykrywano w dodatkowych odcinkach pobranych z bloków przez znakowanie końcowe in situ za pomocą zestawu do fragmentacji DNA Fragen Klenowa (Oncogene Research Products), jak opisano wcześniej.22 Osteoklasty dodatnie pod kątem znakowania końcowego in situ również miały zmiany morfologiczne w tym dyskretnie skondensowana chromatyna, fragmentacja jądra, obwodowe jądro atomowe i kurczenie się komórek. Aby zliczyć się jako apoptotyczny, osteoklast musiał być barwiony przez znakowanie końcowe in situ i mieć co najmniej trzy z czterech kryteriów morfologicznych. Continue reading „Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami czesc 4”

Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami cd

Każda próbka została zakodowana w taki sposób, że czytelnik nie był świadomy przydzielenia grupy badanej pacjentowi. Stwierdzono już, że w grupie alendronianowej w porównaniu z grupą placebo stwierdzono prawidłową grubość osteoidu i zmniejszoną powierzchnię mineralizacyjną (długość kości gąbczastej znakowanej podwójnie tetracykliną i połowę długości kości gąbczastej znakowanej pojedynczą tetracykliną). 3 Zgodnie z naszą wiedzą nie odnotowano wcześniej częstości tworzenia kości i mineralnego przyłożenia oraz liczby osteoklastów. Pomiary histomorfometryczne
W ciągu 24 godzin po biopsji próbki utrwalono w lodowatej 10% formalinie buforowanej fosforanem Milloniga o pH 7,4 i wysłano przesyłką ekspresową do University of Arkansas for Medical Sciences. Na uniwersytecie próbki odwadniano w stopniowanych roztworach etanolu i osadzano je w niewulkanizowanym metakrylanem metylu.18 Ostrza obrotowe z mikrotomem z węglika wolframu o kształcie litery D (Delaware Diamond Knives) były ostrzone co 2 tygodnie, aby zachować jakość sekcji. Continue reading „Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami cd”