Olbrzymia formacja osteoklastów i długotrwała doustna terapia bisfosfonianami czesc 4

Osteoklasty pacjentów w grupie placebo miały mniej niż trzy z tych cech, ale nierzadko wykazywały niewielki stopień oderwania lub pyknozy jądrowej. Osteoklasty zostały następnie sklasyfikowane zgodnie z liczbą profili jądrowych, które można policzyć w sekcjach o grubości 5 .m; te sekcje zawierały tylko niewielką część olbrzymich osteoklastów, które miały grubość 80 .m do ponad 100 .m. Normalny osteoklast pokazano na rycinie 1. Pomiar apoptozy w sekcjach kości niezwiązanych
Apoptozę osteoklastów wykrywano w dodatkowych odcinkach pobranych z bloków przez znakowanie końcowe in situ za pomocą zestawu do fragmentacji DNA Fragen Klenowa (Oncogene Research Products), jak opisano wcześniej.22 Osteoklasty dodatnie pod kątem znakowania końcowego in situ również miały zmiany morfologiczne w tym dyskretnie skondensowana chromatyna, fragmentacja jądra, obwodowe jądro atomowe i kurczenie się komórek. Aby zliczyć się jako apoptotyczny, osteoklast musiał być barwiony przez znakowanie końcowe in situ i mieć co najmniej trzy z czterech kryteriów morfologicznych. W przypadku kontroli negatywnej wykorzystano próbki archiwalne od pacjentów z osteodystrofią nerkową, którzy mieli obfite osteoklasty z powodu wtórnej nadczynności przytarczyc.18
Analiza statystyczna
Aby ocenić zmiany grupowe w danych histomorfometrycznych, zastosowano jednoczynnikową analizę wariancji, a następnie test wielokrotnego porównania Dunnetta.23,24 Dane są zgłaszane jako średnie i standardowe błędy, o ile nie wskazano inaczej; Wartości P mniejsze niż 0,05 uważano za wskazujące na istotność statystyczną. Całkowita doustna dawka alendronianu została obliczona przez pomnożenie dawki dziennej przez liczbę dni, w których została podana. Porównania interesów zostały określone a priori. W związku z tym, porównując grupy pod kątem liczby normalnie występujących osteoklastów, przetestowaliśmy tylko hipotezę, że liczba takich osteoklastów była wyższa w grupie otrzymującej 10 mg alendronianu dziennie (powszechnie stosowana dawka) niż w grupie placebo. . Współczynniki korelacji Pearsona zastosowano do zbadania związku między liczbą osteoklastów a całkowitą ilością podawanego alendronianu. Pacjenci, u których leczenie alendronianem przerwano po 2 latach, zostali wykluczeni, chociaż podobne wyniki uzyskano, gdy włączono wszystkich pacjentów. Wszystkie liczby komórek, w tym zera, zostały uwzględnione w analizach. Reszty z regresji liniowej całkowitej liczby osteoklastów w stosunku do całkowitej ilości alendronianu przeszły test normalności; ten wynik potwierdza zastosowanie współczynników korelacji Pearsona, chociaż podobne wyniki uzyskano przy użyciu współczynników Spearmana.
Wyniki
Standardowe wyniki histomorfometryczne
Tabela 1. Tabela 1. Właściwości histopenometryczne kości po długotrwałym leczeniu alendronianem. Aby ustalić, że alendronian zmniejszył obrót kostny, zgodnie z oczekiwaniami, zbadaliśmy histomorfometryczne pomiary powstawania kości (Tabela 1). Szybkość tworzenia kości zmniejszała się w takim samym stopniu w grupach otrzymujących 1, 5 lub 10 mg alendronianu na dzień (P <0,003 dla każdego porównania z grupą placebo) [przypisy: angio tk tętnic wieńcowych, blog o odchudzaniu z przepisami, leki przeciwbólowe na receptę lista ]